貝類毒素檢測試劑盒采用酶聯免疫法定量檢測麻痹性貝類毒素的存在。麻痹性貝毒是一種毒素,石房蛤毒素是麻痹性貝類毒素的一種。本檢測可用于水產樣本對貝類毒素的定性和定量檢測,例如甲殼類動物的樣本。對于甲殼類動物的需要提前制備樣本。如果條件允許,陽性樣本可以做HPLC,GC/MS或其他方法確認。
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本實驗采用競爭ELISA方法,用特異性抗體識別神經性貝毒。樣本中的神經性貝毒可與貝毒-酶-結合物競爭,同板上羊抗-神經性貝毒抗體結合。洗板加入底物溶液,顯色。藍色的亮度與神經性貝毒在樣本中的濃度成反比。顏色反應在規定時間內終止,顏色用酶標儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過標準曲線來讀取。
安全性說明:
標準品溶液含有少量的神經性貝毒。底物溶液含有四甲基聯苯胺,終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸,可用水洗去。
完整的貝類毒素檢測試劑盒包含以下各組分:
1、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
2、酶標記的抗原或抗體(結合物);
3、酶的底物;
4、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
5、結合物及標本的稀釋液;
6、洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
7、酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。